高速離心機(jī)的幾種分離方法： A.差速離心：逐次增加離心力，每次可沉降樣品溶液中的一些組份。 差速離心是一種zui常用的方法。在這種方法中，離心管在開(kāi)始時(shí)裝滿了均一的樣品溶液。通過(guò)在一定速度下一定時(shí)間的離心后，就可得到兩個(gè)部份：沉淀和上清液。 通常在*次離心時(shí)把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時(shí)所需的組份大部分仍留在上清液中。然后將收集到的上清液以更高速度離心，把所需的粒子沉積下來(lái)。離心的時(shí)間要選擇得當(dāng)，使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對(duì)于得到的沉淀和上清液可以進(jìn)行進(jìn)一步的離心，直到達(dá)到所需要的分離純度為止。 差速離心的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，但分離純度不高。 B.密度梯度離心法：可以同時(shí)使樣品中幾個(gè)或全部組份分離，具有很好的分辨率。 （1）速率區(qū)帶法 根據(jù)樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度（S）。大致步驟如下： 在離心管中裝入密度梯度溶液，溶液的密度從離心管頂部至底部逐漸增加（正梯度）。 將所需分離的樣品小心地加至密度梯度溶液的頂部。樣品在梯度溶液表面形成一負(fù)梯度。 由于不同大小的粒子在離心力作用下，在梯度中移動(dòng)的速度不一樣，所以經(jīng)過(guò)離心后會(huì)形成幾條分開(kāi)的樣品區(qū)帶。 注意：樣品粒子的密度必須大于梯度液注中任一點(diǎn)的密度。離心過(guò)程必須在區(qū)帶到達(dá)管子底部前停止。 （2）等密度離心法 根據(jù)粒子的不同密度來(lái)分離。離心過(guò)程中，粒子會(huì)移至與它本身密度相同的地方形成區(qū)帶。 密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中。經(jīng)離心后，樣品粒子達(dá)到它們的平衡點(diǎn)。 注意：平衡后粒子的分離*由其密度決定，與時(shí)間無(wú)關(guān)，此時(shí)再改變離心轉(zhuǎn)速，只能改變區(qū)帶的相對(duì)位置。 密度梯度分析法 （1）梯度介質(zhì)性質(zhì)與選擇： A、應(yīng)具備的性質(zhì)： 梯度物質(zhì)的選擇原則是滿足分離方法的基本要求，一個(gè)理想的密度材料標(biāo)準(zhǔn)它應(yīng)是： 所形成的溶液密度應(yīng)包括所需要的密度范圍。 具有某些性質(zhì)，如折射率，據(jù)此可測(cè)定它的濃度。 所形成的溶液粘度低。 不損傷所分離的樣品。 離心分離后容易除去。 不妨礙分離積分的分析。 |
會(huì)員_a.png)